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恒遠(yuǎn)問您：轉(zhuǎn)化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)的目的是哪三個方面呢？

點(diǎn)擊次數(shù)：13300 發(fā)布時間：2014/2/17 11:05:21

隨著一場雨又迎來了一個新的工作日，可能剛起床那會還是睡眼惺忪，但是上班的時候可就要進(jìn)入工作狀態(tài)啦！相信當(dāng)聰明的您在看到本文章的標(biāo)題時就能夠知道，我們今天要為您談?wù)f的是關(guān)于轉(zhuǎn)化大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)。

恒遠(yuǎn)問您：轉(zhuǎn)化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)的目的是哪三個方面呢？當(dāng)然，這可不止簡單的一個問題，既然我們問出了，那么就有答案啦。如果您現(xiàn)在移動右手中的鼠標(biāo)去搜索轉(zhuǎn)化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)的話一定會出現(xiàn)很多的相關(guān)資料，有朋友在購買我公司的產(chǎn)品后提出了需要技術(shù)指導(dǎo)，那么我們今天就來仔細(xì)的看看本實(shí)驗(yàn)，*終來解答實(shí)驗(yàn)的目的是哪三個方面。

我們?yōu)槟淼倪@套實(shí)驗(yàn)過程簡單明了，只需要十個步驟就可以完成。

1、事先將恒溫水浴的溫度調(diào)到42℃。

2、從-70℃ 超低溫冰柜中取出一管（100 μl）感受態(tài)菌，立即用手指加溫融化后插入冰上，冰浴5~10 min。

3、加入5 μl 連接好的質(zhì)粒混合液（DNA含量不超過100 ng），輕輕震蕩后放置冰上20 min。

4、輕輕搖勻后插入42℃水浴中1~2 min進(jìn)行熱休克，然后迅速放回冰中，靜置3~5 min。

5、在超凈工作臺中向上述各管中分別加入500 μl LB培養(yǎng)基（不含抗菌素）輕輕混勻，然后固定到搖床的彈簧架上37℃震蕩1 h。

6、在超凈工作臺中取上述轉(zhuǎn)化混合液100-300 μl，分別滴到含合適抗菌素的固體LB平板培養(yǎng)皿中，用酒精燈燒過的玻璃涂布棒涂布均勻。

7、如果載體和宿主菌適合藍(lán)白斑篩選的話，滴完菌液后再在平板上滴加40 μl 2% X-gal，8 μl 20% IPTG，用酒精燈燒過的玻璃涂布棒涂布均勻。

8、在涂好的培養(yǎng)皿上做上標(biāo)記，先放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中30~60 min 直到表面的液體都滲透到培養(yǎng)基里后，再倒置過來放入37℃恒溫培養(yǎng)箱過夜。

9、在被細(xì)菌污染的桌面上噴灑70%乙醇，擦干桌面，寫實(shí)驗(yàn)報告。

10、觀察平板上長出的菌落克隆，以菌落之間能互相分開為好。注意白色菌斑。

上海恒遠(yuǎn)感謝您使用來時間觀看了本篇文章，如果您有什么產(chǎn)品需要以及技術(shù)問題解惑都是可以來電給我公司詢問的。旁余之話我們不多說，這里給出了一個小提醒，在操作時，玻璃涂布棒上的酒精熄滅后稍等片刻，待其冷卻后再涂。實(shí)驗(yàn)過程中也要細(xì)心哦！