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上海恒遠(yuǎn)與您分享：氣泡對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響

點(diǎn)擊次數(shù)：13077 發(fā)布時(shí)間：2017/6/21 10:13:31

在做ELIS實(shí)驗(yàn)的過程中，加樣時(shí)難免會(huì)出現(xiàn)氣泡。通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。在做實(shí)驗(yàn)的過程中，有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產(chǎn)生氣泡，那么氣泡對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)有什么影響呢?

1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。

2.包被時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致包被不完全實(shí)際包被量下降－－弱陽性甚至假陰性。

3.封閉時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在，引起非特異性結(jié)合－－本底增高，假陽性。

4.加樣時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合－－弱陽性甚至假陰性。

5.加二抗時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合－－弱陽性甚至假陰性（競(jìng)爭(zhēng)法相反－－－－假陽性）。

6.加顯色液時(shí)有氣泡的話－－－顯色不完全。

7.加終止液時(shí)有氣泡的話（1、不能完全終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色，OD值增高）

8.洗滌時(shí)有氣泡的話，非特異性結(jié)合物不能完全洗去，做無用功。

避免方法：

1、加樣時(shí)盡量靠近孔底（不要接觸孔底），用力均勻，不要過快過猛。

2、封閉時(shí)一定要加滿孔。

3、洗滌時(shí)一定要加滿孔(重要），氣泡會(huì)浮上來*終驅(qū)除。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。

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