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點擊次數:13237 發(fā)布時間:2019/12/30 9:36:18
血清封閉就是將養(yǎng)殖的非免疫的正常動物采血,然后不加抗凝劑,血液凝固,血快收縮,析出的淡黃色液體。經過特殊工藝處理后的血清,特別適在各類免疫學實驗中用于封閉處理, 比如:IHC、IF/ICC、ELISA等。血清封閉劑主要由小牛血清、PBS配制。
封閉步驟可減少一抗和二抗與非靶標位點進行非特異性結合時所產生的本底信號。理想情況是,封閉劑將占據樣本中的“黏性”位點,比如暴露的帶電性或疏水性蛋白表面,同時不會干擾一抗/二抗識別靶表位,從而盡可能提高信噪比(S/N)。
封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實驗中樣本的封閉。可以封閉待檢樣本中與蛋白質非特異性結合的位點,另外還可以封閉樣品中內源性的Fc片段結合位點,阻斷抗體與樣品中的Fc受體結合,從而降低背景,減少假陽性。對于適用多抗的實驗,二抗種屬來源的正常血清是封閉處理的金標準。
生物試劑的使用常識:
(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強腐蝕性、等特性)。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不允許用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請及時將瓶放回原處,以免遺忘,帶來不便。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(怕產生原試劑的再次污染)。
原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司