18221656311
聯(lián)系人:錢經理
電 話:18221656311
手 機:18221656311
地 址:上海市松江臨港科技城漢橋文化科技園B座
郵 編:200093
傳 真:021-64881400
郵 箱:2885617636@qq.com
阿儀網商鋪:http://www.app17.com/c58469/
手機網站:m.hybiosh.com
點擊次數:13353 發(fā)布時間:2012/7/12 17:03:41
ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
以下是elisa試劑盒的操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法:
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。
2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*后一遍用DDW(超純水)洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
3. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
4. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
5. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
主要代理產品:
試劑盒:ELISA試劑盒、檢測試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學試劑盒、金標檢測試劑盒、細胞凋亡試劑盒、生化試劑盒等。
各種動物血清:內皮細胞專用血清、國產血清、GIBCO胎牛血清等。
抗體:進口原裝抗體、進口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標抗體、雙標抗體、多標抗體、一抗、二抗;免疫組化抗體、免疫熒光抗體、流式細胞抗體、免疫細胞化學抗體等。
細胞:原裝進口細胞、腫瘤細胞、正常細胞、腫瘤耐藥細胞等。
培養(yǎng)基:顯色培養(yǎng)基、大腸桿菌培養(yǎng)基、干燥培養(yǎng)基、其它菌檢測培養(yǎng)基等等。
公司名稱:上海恒遠生物科技有限公司
電話:021-60517348
傳真:021-64881400
手機:18221656311
聯(lián)系人:王經理
地址:上海市楊浦區(qū)控江路1029弄B幢101室
郵箱:2675483613@qq.com
郵編:200093
原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司
掃一掃,關注我們!
首 頁| 公司介紹| 產品展示| 公司新聞| 技術文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言
阿儀網 設計制作,未經允許翻錄必究. 聯(lián)系人:錢經理 聯(lián)系電話:18221656311 ICP備案號:滬ICP備11004148號-11 總訪問量:7684060 管理登錄
主營產品:ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,裸鼠ELISA試劑盒,倉鼠ELISA試劑盒,標準品,培養(yǎng)基和生物試劑等