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將樣加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會與HEV的多肽抗原結合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結合物就會與次孵育結合上的HEVIgM抗體相結合，洗板除去未結合的酶結合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應，只有那些含有HEVIgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應，并在波長:450nm處測量O.D.值，按照本HEVIgM抗體ELISA試劑盒的測試標準，O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。 tunnel試劑盒與ELISA試劑盒的區(qū)別：tunnel試劑盒即為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法。
原理：細胞凋亡中，染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3’末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3’末端，從而可進行凋亡細胞的檢測。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有3’末端形成，很少能夠被染色。TUNEL實際上是分子生物學與形態(tài)學相結合的研究方法，對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色，能準確地反應細胞凋亡典型的生物化學和形態(tài)特征，可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細胞和從組織中分離的細胞的細胞形態(tài)測定，并可檢測出極少量的凋亡細胞，因而在細胞凋亡的研究中被廣泛采用。
近二十幾年來，免疫學分析方法發(fā)展突飛猛進，尤其是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術以后，使原來許多經(jīng)典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。繼50年代的免疫熒光和60年代的放射免疫分析技術之后，在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術。由于酶的高效生物催化作用，一個酶分子在數(shù)分鐘內可以催化幾十幾百個底物分子發(fā)生反應，產(chǎn)生了放大作用，使得原來極其微乎其微的抗原或抗體在數(shù)分鐘后就可被識別出來，這種技術被稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗法，本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相繼分別報道后，現(xiàn)已引起廣泛重視。
ELISA試劑盒方法是免疫診斷中的一項新技術，現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大，可概括四個方面：
1.免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2.研究抗酶抗體的合成。
3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。
4.定量檢測體液中抗原或抗體成份。
酶聯(lián)免疫吸附試驗法以其靈敏度高(可達ng甚至pg水平)，特異性好等優(yōu)點，在生命科學各領域得到廣泛應用，它已邁出醫(yī)藥、臨床領域，步入農(nóng)業(yè)、漁業(yè)、畜牧業(yè)和食品加工業(yè)。
ELISA試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎病毒IgM抗體ELISA檢測。ELISA試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。
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