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小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)ELISA試劑盒

小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)ELISA試劑盒
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價格: 4900

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采購度:154    原產地:美洲

發(fā)布時間:2018/3/7 15:26:42

產品簡介:小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)的含量。

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詳細信息
 
 小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)elisa試劑盒

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

小鼠RAS癌基因家族成員RAB5a(RAB5a)ELISA試劑盒的抑制性測定法操作步驟
本法首先是將特異性抗體a包被于固相載體,經洗滌加入含有欲測抗原之待檢樣品。經孵育洗滌后再加一次未標記的特異性抗體b,而這次加入的抗體b于次包被于固相載體上的特異性抗體a對被測抗原來說都是特異性的,但不是用同種動物免疫制備的,否則可出現(xiàn)非特異性反應。經孵育洗滌后,再加酶標記抗b抗體,再經孵育洗滌后加底物顯色進行測定。這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體。因此,放大的倍數(shù)更高,故比雙抗體夾心法更加靈敏。同時避免標記特異性抗體,而另一優(yōu)點是只要標記一種抗抗體,即可達到多種應用。 
用于測定抗原的尚有第4種叫做抑制性測定法(見圖),它是先用抗原包被固相載體,然后分為二組,一組加入用參考抗體和被檢標本混合孵育后的混合溶液,假如標本中不含抗原,則參考抗體未被結合。因此它可以和包被于固相載體上的抗原結合。如標本中含有抗原,則抗原先與參考抗體結合,故參考抗體不再與包被于固相載體上的抗原結合。對加入酶結合物(抗球蛋白)和底物僅顯示剩余結合的抗體量。再與另一組不加待檢標本的參考系統(tǒng)比較,被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原量成比例,二者之差,即為欲測抗原的量。
被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原的量成比例,二者之差即為欲測抗原的量。

ELISA常用的幾種方法

一、雙抗體夾心法測定抗原
將抗原免疫種動物獲得的抗體吸附于固相表面;
加抗原,形成抗原-抗體復合物;
加抗原免疫第二種動物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復合物;
加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);
加底物。底物的降解量=抗原量。
二、直接法測定抗原
將抗原吸附在載體表面;
加酶標抗體,形成抗原—抗體復合物;
加底物。底物的降解量=抗原量。
三、間接法測定抗體
將抗原吸附于固相載體表面;
加抗體, 形成抗原-抗體復合物;
加酶標抗體;
加底物。 測定底物的降解量=抗體量。

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